2021-08-24 15:47:54
什么是肌酐？
肌酐是一种低分(fēn)子量的含氮化合物(wù)，由肌肉组织中的磷酸肌酸和肌酸通过非酶促、不可(kě)逆的脱磷酸反应生成的代謝(xiè)终产物(wù)。肌酐仅由肾小(xiǎo)球滤过进入原尿，不被肾小(xiǎo)管重吸收。血中的肌酐来源包括外源性和内源性两部分(fēn)，内源性肌酐每日生成量几乎保持恒定，严格控制外源性肌酐的摄入时，血肌酐浓度為(wèi)稳定值，因此，血清肌酐浓度是评价肾小(xiǎo)球滤过功能(néng)的重要指标。
肌酐测定临床意义
1.血清肌酐：改善全球肾脏病预后组织（KDIGO）指南推荐主要基于血清肌酐（Scr)计算的估算的肾小(xiǎo)球滤过率（GFR），作為(wèi)肾功能(néng)评估和肾损伤筛查的指标。
2.尿液肌酐：尿肌酐与血清肌酐同时测定，用(yòng)于计算肌酐清除率，以评价肾小(xiǎo)球的滤过功能(néng)；尿微量白蛋白与尿肌酐比值（ACR）可(kě)作為(wèi)慢性肾病诊断标志(zhì)物(wù)。《中國(guó)糖尿病肾脏疾病防治指南》推荐2型糖尿病患者每年应至少进行一次UACR和eGFR检测，以便早期发现糖尿病肾脏疾病（DKD）。
肌酐检测方法學(xué)
目前检测肌酐的方法學(xué)主要有(yǒu)苦味酸法、酶法、放射性核素稀释质谱法、高效液相色谱法、毛细管電(diàn)泳法和電(diàn)极法等。
1. 苦味酸法（Jaffe法）
是检测肌酐最经典的方法，其原理(lǐ)是在碱性条件下肌酐与苦味酸反应生成橙红色结合物(wù)，在505-520nm波長(cháng)处测其吸光度来反映肌酐的水平。该方法的优点是成本地低廉，操作简便，缺点是特异性不强，抗干扰能(néng)力差，易受血中很(hěn)多(duō)“假肌酐”的干扰，如丙酮酸、胆红素、乙酰乙酸盐、葡萄糖、蛋白质等，这些物(wù)质也会与苦味酸发生有(yǒu)色反应从而影响肌酐的检测结果。虽然有(yǒu)些临床实验室使用(yòng)改良的苦味酸法，但均或多(duō)或少存在各种问题。
2. 酶法
酶法主要包括肌氨酸氧化酶法与肌酐亚胺水解酶法。肌氨酸氧化酶法是通过肌酐酶的作用(yòng)使肌酐水解成肌酸和尿素，肌酸又(yòu)可(kě)经一系列反应生成H2O2等，最后偶联Trinder反应形成的醌亚胺色素与肌酐的浓度成正比，可(kě)用(yòng)比色测定。肌氨亚胺水解酶法是通过肌酐亚氨基水解酶将肌酐水解，经一系列反应生成谷氨酸，通过测定340nm处的吸光度降低速率计算肌酐水平。酶法抗干扰能(néng)力相对较好且交叉污染相对少，但试剂成本相对较高。
3.同位素稀释质谱法
该方法的原理(lǐ)是将已知丰度与质量的同位素稀释剂与样本混合，用(yòng)质谱检测混合前后样本丰度的变化，求得样本中某种元素水平的方法。该方法具有(yǒu)很(hěn)高的特异性，而且精密度与准确度也非常好，不产生系统误差，是检验临床指标量值最常用(yòng)的参考方法，但由于该方法的检测成本较高和辐射污染等问题，通常只用(yòng)于产生一级参考测量程序、评价参考方法和对自己标准品定值。
4.高效液相色谱法（HPLC）
HPLC通过阳离子交换层析柱将肌酐分(fēn)离出来，再测得其在233 nm处的A值，从而检测出血肌酐水平。该方法的精密度和准确度高，特异型好，但检测过程比较繁琐，并不适合用(yòng)于临床大批量样本的检测，通常作為(wèi)肌酐测定的参考方法。
5.毛细管電(diàn)泳法
毛细管電(diàn)泳法是通过毛细管電(diàn)泳将血清中的肌酐分(fēn)离出来，然后检测234 nm处的吸光度计算肌酐值。该方法效率高，样本用(yòng)量少，分(fēn)析速度快，并可(kě)排除體(tǐ)内“假肌酐”对血肌酐测定的干扰。但毛细管内壁易吸附蛋白质，导致该法的重复性较差，因此不适用(yòng)于临床常规检测。
6.電(diàn)极法
電(diàn)极法是通过半酶法，利用(yòng)离子选择性電(diàn)极对肌酐进行测定的一种方法。该方法虽然操作比较简单，速度也较快，但抗内源性物(wù)质干扰的能(néng)力较差，故在临床上也并不常用(yòng)。
我國(guó)室间质评情况
目前在國(guó)家药监局网站获得肌酐检测注册证的厂家所采用(yòng)的方法學(xué)主要為(wèi)苦味酸法和酶法，其中注册苦味酸的厂家约60余家，注册酶法的厂家约有(yǒu)200余家，参加室间质评的单位主要也是使用(yòng)的苦味酸法和酶法。
通过对全國(guó)1402家实验室发放的5个不同浓度批次的质评物(wù)进行肌酐检测的室间质评调查，按照2种检测方法（苦味酸法和酶法）和11套检测系统分(fēn)组，结果分(fēn)析中，苦味酸法组CV范围為(wèi)1.03～18.23%，酶法组CV為(wèi)1.5～8.08%，肌酐不同检测系统试验室间变异情况酶法组优于苦味酸法组。
在广东2014年室间质评中，第一次室间质评有(yǒu)71家实验室使用(yòng)苦味酸法，52家使用(yòng)酶法，第二次有(yǒu)37家使用(yòng)苦味酸法，64家使用(yòng)酶法。第一次室间质评苦味酸法和酶法能(néng)力比对检验（PT）合格率分(fēn)别為(wèi)57.46%和83.85%，第二次分(fēn)别為(wèi)83.78%和97.19%，苦味酸法检测的变异系数在6.67%～19.26之间，酶法变异系数在3.78%～11.43%之间，可(kě)以看出酶法检测肌酐的质量明显优于苦味酸法。
在对天津109家实验室室间质评结果分(fēn)析中，测定高值质控品苦味酸法和酶法平均CV分(fēn)别為(wèi)8.7%和3%，低值质控平均CV分(fēn)别為(wèi)34.3%和9.3%，可(kě)见基质效应对肌酐测定结果尤其是苦味酸法检测低值质控影响很(hěn)大，酶法测定结果显著优于苦味酸法。
小(xiǎo)结
通过肌酐注册和实验室使用(yòng)情况来看，目前检测肌酐主要使用(yòng)的方法學(xué)為(wèi)苦味酸法和酶法，两种方法各有(yǒu)优劣势，苦味酸法检测成本低，但干扰因素多(duō)，而酶法虽成本更高，但结果准确性和重复性更好，線(xiàn)性范围更宽，因此推荐有(yǒu)条件的实验室可(kě)使用(yòng)酶法检测肌酐。
國(guó)赛现已获肌酐检测试剂盒注册证，使用(yòng)的方法為(wèi)肌氨酸氧化酶法，用(yòng)于Aristo U和Aristo Ur检测系统，可(kě)联合多(duō)种散射比浊法尿特定蛋白在同一台仪器上检测，同时出具ACR和各尿蛋白的检测结果，并可(kě)以尿液流水線(xiàn)轨道联机，实现一管尿液多(duō)项检测，為(wèi)肾脏病的诊断提供更简便、更完善的解决方案。
参考文(wén)献
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